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Analisi della cocaina, un nuovo metodo in elettroforesi capillare
fonte: Electrophoresis

Gli aptameri sono delle sequenze lineari di acidi nucleici che presentano una elevata affinità di legame, specifica per diversi target. In ambito analitico, trovano impiego in colorimetria, fluorescenza, elettrochimica, elettroforesi capillare e spettrometria di massa in quanto termicamente stabili, piccoli, poco costosi, tolleranti a variazioni di pH, semplici da sintetizzare e facilmente marcabili. Tra le tecniche analitiche l'elettroforesi capillare (EC) è una metodologia separativa molto attrattiva in quanto è estremamente rapida, ha alta risoluzione, consuma piccole quantità di campione ed è adattabile a vari metodi di rivelazione. Il professor Xin-Xiang Zhang della Peking University di Beijing in Cina ha sfruttato questa tecnica in modo innovativo, introducendo l'uso di aptameri per l'identificazione della cocaina in campioni incogniti, metodologia descritta nella rivista Electrophoresis. Un aptamero costituito da DNA marcato con una sostanza fluorescente, la carbossifluorescina (fluorescein amidite, FAM) è stato dapprima incubato con filamenti complementari di DNA per formare dei dimeri, dopodiché gli aptameri liberi e quelli legati sono stati separati e determinati attraverso l'uso di EC mediata da cationi metallici e rivelati con fluorescenza indotta da laser. Il legame di un nucleotide ad un aptamero comporta variazioni del rapporto massa su carica dei complessi che si formano, variando la loro mobilità elettroforetica, a seconda del complesso. L'applicazione a piccole molecole rispetto alle proteine è piuttosto complessa, tuttavia gli autori hanno applicato il concetto dello "switch strutturale". Quando nella miscela viene introdotta la molecola target, la cocaina in questo caso, la forma dimera viene destabilizzata comportando una variazione delle intensità di fluorescenza degli aptameri, permettendone la rivelazione. Il nuovo metodo, secondo gli autori, potrebbe costituire una strategia universale di identificazione di piccole molecole.

Qin-Pei Deng, Cai Tie, Ying-Lin Zhou, Xin-Xiang Zhang. Cocaine detection by structure-switch aptamer-based capillary zone electrophoresis. Electrophoresis. Volume 33, Issue 9-10, pages 1465-1470, May 2012.

(Articolo pubblicato dal CUFRAD sul sito www.alcolnews.it)